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试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

题目

试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

相似考题

1.（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_________；获得转基因母牛后，如果_________即说明目的基因已经表达。

2.转基因是将（）导入受体细胞的过程。A、外源蛋白B、细菌C、外源氨基酸D、外源基因

3.试述转基因技术应用价值和可能造成的危害。

4.超级猪、转基因大豆、转基因鲤鱼是用下列哪项生物技术生产出来的()A、体外受精技术B、胚胎移植技术C、基因导入技术D、以上都可以

更多“试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。”相关问题

  • 第1题：

    常用的外源基因导入受体细胞的方法有（）（）（）


    正确答案:化学法；电击法；显微注射法

  • 第2题：

    转基因生物的外源基因检测方法有哪些？


    正确答案: （1）形态标记。形态标记是指在杂种后代中那些可被直接观察到的性状，如植株的茎、叶、穗、籽粒各部分大小、色泽、形状及抗病性表现等。这是检测外源基因最常用的、也是最直观的方法。一般是参照双亲的特征，根据杂咱后代的表现情况，来确定杂种后代中是否有外源基因导入。
    （2）细胞标记。细胞标记，即细胞学鉴定。通过对染色体的数目和形态特征观察、染色体带型和核型分析以及减数分裂染色体配对行为的观察，来检测外源基因。这是检测外源基因最基本、最经典的方法。
    具体包括：
    A.杂种细胞学，观察通过对杂种体细胞染色体观察，统计其染色体数目，并结合花粉母细胞减数分裂中期染色体配对行为观察，来确是否有外源基因导入。通过染色体计数和配对行为观察，很容易确定双二倍体、部分双二倍体、附加系、单体、缺体、端体等染色体的数目和类型。利用有无随体染色体，也可鉴定外源基因。
    B.核型及核型分析，核型通常是指体细胞染色体所有可测定的表型特证的总称。核型分析就是对核型的各种特征进行定量或定性的表达。核型分析的染色体，一般以体细胞分裂中期的染色体作为基本形态。在核型分析的表述格式中，一般包括染色体数目和染色体形态特征，形态特征主要包括相对长度、臂比、着丝点位置和随体的有无。染色体的分类目前采用应用最广泛的两点四区系统，我国于1984年第一届全国植物染色体学术讨论会上稍加修改后推行。根据臂比值将染色体分为正中部着丝点（M）、中部着丝点区（m）、近中部着丝点区（sm）、近端部着丝点区（st）、端部着丝点区（t）和端着丝点（T）即所谓的两点四区。
    C.染色体分带，染色体分带技术是通过一定的碱、酸、盐、温度等因素对染色体进行处理，借助Giemsa等染料染色，使染色体在一定部位呈现深浅程度不同的染色区段而形成特定的带纹，由于其带纹在各染色体上显示的位置、宽窄、大小、数目、浓淡等具有相对的稳定性，故可用来进行染色体的鉴别和分析。
    （3）生化标记。生化标记是利用电泳等技术对生物大分子，如蛋白质、酶等进行鉴定。因为蛋白质是由基因编码的，特定的基因型决定了蛋白质的特定组成，因此，不同种、属所特有的蛋白质组成能够反映出该种、属的基因型。
    具体包括：
    A、贮藏蛋白分析法，按其溶解特性可分成谷蛋白和醇溶蛋白两大类，其蛋白的亚基存在着丰富的变异类型，不受环境条件影响而能稳定遗传。
    B、同工酶分析法，同工酶是结构不同但功能相同的一类酶。在一定条件下电泳染色，同一遗传材料可同时显示几条酶带，而不同的遗传材料可具有不同的酶带。同工酶是基因的直接产物，是基因表达的结果。
    （4）分子标记。分子标记是继形态标记、细胞标记、生化标记之后的一种新的分子遗传标记方法，它是以DNA多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记，能够稳定遗传，且遗传方式比较简单，是性状基因的真实反映，能在不同发育阶段对不同组织DNA进行检测分析。目前，用于检测小麦外源基因的分子标记主要有限制性片段长度多态性（restriction fragment length length polymorphism 简称 RFLP）、随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA 简称 RAPD ）和基因组原位杂交（genomic in situ hybridization 简称 GISH）。这项新技术越来越受到重视，特别是在检测外源小片断染色时更是倍受青睐。 
    具体包括：
    A、RFLP，RFLP技术是基于不同物种、不同材料间基因组DNA的限制性内切酶识别位不同的原理，通过对基因组DNA经特定的限制性内切酶消化，产生不同大小的DNA片断，经电泳后转移到固定支撑物上，用特定的放射性标记的DNA片断（探针）杂交检测多态性。它是检测不同物种个体间基因细微差异的可靠手段，标记的数量较大，呈简单的孟德尔显性遗传。RFLP是较早应用于植物基因标记的一项分子标记技术。 
    B、RAPD，RAPD技术是基于聚合酶链式反应原理，通过运用不同核苷酸序列的随机引物（通常为10个碱基）对基因组DNA进行扩增，对扩增产物进行电泳寻找多态性标记。这类标记通常也是显性遗传，由于它在技术上非常简单，也无需对基因组序列有多少了解，只要合成一套随机引物就可用于作物物种，因而应用最为广泛。RAPD技术最大的缺点是稳定性差，易受不同药品的影响。为了提高该标记的稳定性和重复性，有必要将RAPD技术转化为特异序列扩增的SCAR(Sequence characterized amplified region )标记。即将RAPD作为初步筛选鉴定的一种方法，一旦发现所需的DNA扩增产物之后，再用特异序列扩增的方法，将RAPD转变成经典的PCR方法。 
    C、FISH，这是一项利用标记的DNA探针与染色体上的DNA杂交，在染色体上直接进行检测的分子标记技术。该项技术在研究内容，研究方法上将传统的细胞遗传学与现代分子遗传学结合起来，形成一门新的交叉学科――分子细胞遗传学。制作良好的染色体分裂相片子是该技术的关键。其最大优点是利用普通的显微镜，可以直接鉴定到所要研究的基因在染色体上的位置和分布。
    总之，形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记是检测外源基因重要的遗传标记形式。形态标记检测方法简便易行，提供直接的结果，但标记数少、多态性差、易受环境条件影响。 •细胞标记检测是最经典的方法，但工作量大，费人才。生化标记检测设备简单，试剂价格低廉，但标记数目有限。分子标记检测结果可靠，但仪器、试剂都较昂贵，其利用受到一定的限制。各种遗传标记形式都有其局限性，在检测外源基因时，可根据研究条件、研究目的及研究对象，合理地选择相应的检测方法。在实际应用中，常常将几种标记结合起来使用，其结果相互印证，提高了检测结果的准确性和可靠性。

  • 第3题：

    转基因技术中外源基因整合的检测适宜的方法有（）。

    • A、特异性mRNA的检测
    • B、采用Southern技术，以外源DNA作为探针，进行杂交检测
    • C、酶联免疫吸附法（ELISA）
    • D、Northern杂交

    正确答案:B

  • 第4题：

    试述传统育种技术与转基因技术的异同。


    正确答案: 都是通过获得优良基因对目标动、植物进行遗传改良。但在基因转移的范围和效率上有差别：
    （1）传统育种技术是在生物个体水平上进行，操作的对象是整个基因组，所转移的是大量的基因，不可能准确地对某个基因进行操作和选择，对后代的预见性差，选出优良性状的概率差。所需时间长，要经过数代不断选种和繁育，数年或几十年才能育成一个优良的品种。转基因技术所操作和转移的一般是明确的基因，功能清楚，目的基因被转移到受本后其表现可预测，并在短期内表现出人类所期望的遗传性状。
    （2）传统育种技术是只能在种内个体间实现基因转移，血缘关系较远的生物间通过传统的杂交进行基因转移的难度非常大。转基因技术所转移的基因不受生物体间亲缘关系的限制，可有效地避免种间、属间甚至动植物间物种杂交的不亲和，打破了自然繁殖中的种间隔离。通过对动、植物基因组的定向改造，使基因能在种系关系较远的机体间流动，大大提高了动、植物品种改良的效率。

  • 第5题：

    转基因作物是将有用的外源基因通过杂交育种的方法来获得转基因植株。（）


    正确答案:错误

  • 第6题：

    自（）年，第一次成功地将外源基因导入动物胚胎，创立了转基因的动物技术。

    • A、1980
    • B、1981
    • C、1982
    • D、1983

    正确答案:B

  • 第7题：

    动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些？各有何优缺点？


    正确答案: 显微注射法：优点：准确、快捷。缺点：成本很高。
    体细胞核移植方法：优点：经济、有效。缺点：耗时。

  • 第8题：

    单选题
    转基因技术中下列外源基因的导入方法中，对鱼类暂不适应的方法是（）。
    A

    组织注射法

    B

    病毒（噬菌体）颗粒转导法

    C

    精子介导法

    D

    显微注射法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    填空题
    常用的外源基因导入受体细胞的方法有（）（）（）

    正确答案： 化学法,电击法,显微注射法
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    转基因技术中外源基因整合的检测适宜的方法有（）。
    A

    特异性mRNA的检测

    B

    采用Southern技术，以外源DNA作为探针，进行杂交检测

    C

    酶联免疫吸附法（ELISA）

    D

    Northern杂交


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    转基因技术中外源基因表达产物检测不适宜的方法有（）。
    A

    特异性mRNA的检测

    B

    报告基因的酶法检测

    C

    酶联免疫吸附法（ELISA）

    D

    Southern印迹法


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    试述植物基因工程中转基因的主要方法，其优缺点是什么？

    正确答案： 植物基因工程主要使用两种方法。
    1、根癌农杆菌法 以T-DNA为载体，装载目的基因，构建的双元表达载体导入根癌农杆菌中，与外植体共转化，使外源基因转入受体植物中
    优点：方法简便，多为单拷贝或少拷贝，转化效率高
    缺点：受外植体， 基因型等影响
    2、基因枪法 利用基因枪将外源DNA转入受体植物中
    优点：转化效率高，可对广泛的植物进行转化
    缺点：转化植物往往多拷贝. 遗传不稳定。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    转基因植物中外源基因的存在问题：外源基因在后代中的遗传多样性和外源基因在后代中表达的（）。


    正确答案:不确定性

  • 第14题：

    转基因技术中外源基因表达产物检测不适宜的方法有（）。

    • A、特异性mRNA的检测
    • B、报告基因的酶法检测
    • C、酶联免疫吸附法（ELISA）
    • D、Southern印迹法

    正确答案:D

  • 第15题：

    转基因技术中外源基因的整合效率受到外源DNA拷贝数（剂量）、片断长度（构型）、注射方式等因素的影响，而与受体鱼种类无关。


    正确答案:错误

  • 第16题：

    试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。


    正确答案: （一）显微注射法
    （1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
    （2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
    （3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
    （二）电穿孔转化法
    （1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
    （2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
    （3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
    （三）精子介导法
    （1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
    （2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
    （3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
    （四）基因枪转化法
    （1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
    （2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
    （3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
    （五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
    用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
    转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
    （六）组织注射法
    将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。

  • 第17题：

    下列关于基因工程的叙述中，错误的是（）

    • A、基因工程常用的运载体包括细菌的质粒、噬菌体、动植物病毒
    • B、将目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是用Ca2+处理细胞
    • C、转基因羊在培育过程中还用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术
    • D、基因治疗是把有基因缺陷的细胞中的缺陷基因剔除后再导入健康的外源基因

    正确答案:D

  • 第18题：

    转基因技术中下列外源基因的导入方法中，对鱼类暂不适应的方法是（）。

    • A、组织注射法
    • B、病毒（噬菌体）颗粒转导法，
    • C、精子介导法，
    • D、显微注射法

    正确答案:B

  • 第19题：

    生产转基因动物的常用方法有哪些？各有何优缺点？


    正确答案:六种方法：
    （1）原核期胚胎的显微注射技术，优点：有外源基因长度不受限制，可直接用不含原核载体DNA片段的外源基因进行转移；实验周期相对较短。缺点：大动物原核胚的胚胎胞质中含有大量的泡状颗粒，影响其透光性，且显微操作技术含量较高，需要特殊的仪器并可能在注射过程中对胚胎造成损伤等；外源基因能否整合到受体基因组中，要等到子一代出生后经过选择才能确定，这对生育周期长，产仔少的大动物来说，效率就很低，而且整合位点随机，易造成宿主基因组内生命活动所必需的基因失活和导致胚胎或动物死亡；整合一般是指多拷贝首尾串联相接，不利于研究基因结构、功能及表达调控。
    （2）反转录病毒技术，优点：感染率高，易转染，操作简单，而且多数为单拷贝，并可稳定的整合到可识别插入位点。缺点：反转录病毒作为载体，其插入的外源基因最大不能超过10KB，并且容易产生嵌合体。另外，插入的外干扰源基因容易丢失，反转录病毒本身的DNA序列也会干扰外源基因的表达。还有反转录病毒在安全方面仍存在问题。
    （3）慢病毒载体技术，优点：高效的转染率和转基因的高表达。缺点：插入外源基因需小于8.5kb和插入突变，经传代整合后所得原病毒DNA易发生甲基化，影响外源基因表达。
    （4）精子载体技术，优点：简单易行，直接可以用精子作为外源DNA载体进行基因转移。可以对大量的精子细胞进行处理，不损伤卵母细胞，在短时间内生产转基因胚胎，而且整合率高，成本低。缺点：结果不稳定，有的外源DNA并未整合到宿主的基因组中，而是以附加体的形式存在于染色体之外，由于存在于正常的细胞有丝分裂中，附加体丢失的概率很高。
    （5）体细胞核移植转基因技术，优点：动物转基因效率大幅提高，体细胞克隆技术可将基因整合和生产胚胎分开操作，有利于使用基因打靶技术。缺点：克隆技术的效率有待提高。
    （6）胚胎干细胞介导技术，优点：可以将外源基因整合到细胞的染色体组中，然后把这些干细胞经过筛选，找到理想的干细胞，大大减少了整合突变率，还可以消除随机整合产生的位置效应的影响。

  • 第20题：

    单选题
    自（）年，第一次成功地将外源基因导入动物胚胎，创立了转基因的动物技术。
    A

    1980

    B

    1981

    C

    1982

    D

    1983


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    转基因是将（）导入受体细胞的过程。
    A

    外源蛋白

    B

    细菌

    C

    外源氨基酸

    D

    外源基因


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    试述传统育种技术与转基因技术的异同。

    正确答案： 都是通过获得优良基因对目标动、植物进行遗传改良。但在基因转移的范围和效率上有差别：
    （1）传统育种技术是在生物个体水平上进行，操作的对象是整个基因组，所转移的是大量的基因，不可能准确地对某个基因进行操作和选择，对后代的预见性差，选出优良性状的概率差。所需时间长，要经过数代不断选种和繁育，数年或几十年才能育成一个优良的品种。转基因技术所操作和转移的一般是明确的基因，功能清楚，目的基因被转移到受本后其表现可预测，并在短期内表现出人类所期望的遗传性状。
    （2）传统育种技术是只能在种内个体间实现基因转移，血缘关系较远的生物间通过传统的杂交进行基因转移的难度非常大。转基因技术所转移的基因不受生物体间亲缘关系的限制，可有效地避免种间、属间甚至动植物间物种杂交的不亲和，打破了自然繁殖中的种间隔离。通过对动、植物基因组的定向改造，使基因能在种系关系较远的机体间流动，大大提高了动、植物品种改良的效率。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

    正确答案： （一）显微注射法
    （1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
    （2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
    （3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
    （二）电穿孔转化法
    （1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
    （2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
    （3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
    （三）精子介导法
    （1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
    （2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
    （3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
    （四）基因枪转化法
    （1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
    （2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
    （3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
    （五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
    用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
    转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
    （六）组织注射法
    将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    判断题
    转基因技术中外源基因的整合效率受到外源DNA拷贝数（剂量）、片断长度（构型）、注射方式等因素的影响，而与受体鱼种类无关。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

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