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  • 第1题:

    检测RNA病毒的分子生物学方法是

    A、反转录PCR(RT-PCR)

    B、套式PCR(Nested PCR)

    C、多重PCR(Multiplex PCR)

    D、任意引物PCR(Arbitrarily Primed PCR)

    E、限制性片段长度多态性(RFLP)分析


    参考答案:A

  • 第2题:

    最精确、最直观的检测HLA基因多态性的方法是

    A.PCR-SSP
    B.PCR-SBT
    C.PCR-SSO
    D.PCR-RFLP
    E.PCR-SSCP

    答案:B
    解析:
    考点:HLA基因多态性的检测方法。 PCR-SBT方法是一种通过对扩增后的HLA基因片段进行核酸序列测定,从而判断HLA基因多态性的方法,是最精确、直观的方法。

  • 第3题:

    可用于扩增未知序列的PCR方法是()

    • A、对称PCR
    • B、反向PCR
    • C、RT-PCR
    • D、不对称PCR
    • E、嵌套PCR

    正确答案:B

  • 第4题:

    能使扩增灵敏度提高的方法是()

    • A、多重PCR
    • B、巢式PCR
    • C、原位PCR
    • D、反向PCR
    • E、不对称PCR

    正确答案:B

  • 第5题:

    不对称PCR


    正确答案:是用不等量的一对引物,PCR扩增后产生大量的单链DNA(SSDNA).这对引物分别称为非限制引物与限制性引物,其比例一般为50~1001∶,在PCR反应的最初10~15个循环中,其扩增产物主要是双链DNA,但当限制性引物(低浓度引物)消耗完后,非限制性引物(高浓度引物)引导的PCR就会产生大量的单链DNA。因PCR反应中使用的二种引物浓度不同,因此称为不对称PCR。

  • 第6题:

    对于极微量的靶序列的扩增可以采用下列哪种PCR技术?()

    • A、AP-PCR方法(arbitrarily  primed  PCR)
    • B、通用引物-PCR方法(general  primer-mediated  PCR,GP-PCR)
    • C、套式PCR(nested  primers-polymerase  chainreaction,NP-PCR)
    • D、多重PCR(multiplexPCR)
    • E、原位PCR技术(in  situ PCR,ISPCR)

    正确答案:C

  • 第7题:

    对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是()

    • A、通用引物-PCR方法(general primer-media-ted PCR,GP-PCR)
    • B、多重PCR(multiplex PCR)
    • C、套式PCR(nested primers-polymerase chain reaction,NP-PCR)
    • D、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)
    • E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)

    正确答案:C

  • 第8题:

    专门用于制备单链DNA的PCR技术是()

    • A、对称PCR
    • B、反向PCR
    • C、RT-PCR
    • D、不对称PCR
    • E、嵌套PCR

    正确答案:D

  • 第9题:

    问答题
    解释PCR、DNA—PCR、RT—PCR、原位PCR和定量PCR?

    正确答案: (1)PCR是聚合酶链反应(Polymerase chain reaction)的英文缩写,是近年来发展起来的一种在体外特异扩增某一目的DNA片段的技术。
    (2)DNA—PCR:以DNA为模板,扩增特定核苷酸序列。主要用于检测特定基因或DNA片段的存在,并常与核酸分子杂交结合,分析检定基因突变。
    (3)RT—PCR:用提取的mRNA或总RNA(含有mRNA)为模板,通过逆转录扩增cDNA。是检测特定基因表达水平的主要方法之一,也是用于鉴别、诊断RNA病毒的重要技术。
    (4)原位PCR:与原位杂交一样,原位PCR也无需提取DNA/RNA,直接用组织切片和细胞进行PCR或RT—PCR。它既能鉴定含有靶DNA/RNA序列的细胞,又能确定靶DNA/RNA序列在细胞内或染色体上的位置。
    (5)定量PCR:PCR产物经凝胶电泳分离转移膜上,与放射性核素或化学发光标记的核酸探针杂交。根据放射自显影或化学发光后底板爆光的强弱,用密度计扫描定量。此法在基因诊断中应用甚广。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    名词解释题
    不对称PCR

    正确答案: 不对称PCR:不对称PCR的目的是扩增产生特异长度的单链DNA。PCR反应中采用两种不同浓度的引物,一般采用50~100:1比例,最初的10~15个循环中主要产物还是双链DNA,但当低浓度的引物被消耗尽后,以后的循环只产生高浓度引物的延伸产物,结果产生大量单链DNA。因PCR反应中使用二种引物浓度不同,因此称为不对称PCR。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    能使扩增灵敏度提高的方法是()
    A

    多重PCR

    B

    巢式PCR

    C

    原位PCR

    D

    反向PCR

    E

    不对称PCR


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    专门用于制备单链DNA的PCR技术是(  )。
    A

    对称PCR

    B

    反向PCR

    C

    RT-PCR

    D

    不对称PCR

    E

    嵌套PCR


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外,还包括

    A、水浴式PCR仪

    B、梯度PCR仪

    C、原位PCR仪

    D、变温金属块式PCR仪

    E、变温气流式PCR仪


    参考答案:BC

  • 第14题:

    简述不对称PCR。


    正确答案: 不对称PCR的基本原理是采用不等量的一对引物产生大量的单链DNA。
    分为引物浓度不对称PCR和热不对称PCR。结果是产生大量的单链DNA,又避免了在检测时要先出去剩余引物的操作。
    引物浓度不对称PCR:两引物的浓度不同,其中浓度低的为限制性引物,起决定性作用,只有当限制性引物耗尽后才会开始大量产生ssDNA;浓度高的为非限制性引物。前10-15循环为双链产物,而后为单链。 常规热不对称PCR(常规引物长度不对称PCR):一对引物的碱基数目与组成不同造成退火温度不同。将限制性引物比非限制性引物的退火温度低至少10度。在刚开始的10~15个循环中,退火温度略低于限制性引物的退火温度,产生双链DNA,以耗尽限制性引物;之后的退火温度便以非限制性引物的退火温度为准,大量产生单链DNA。
    交错式热不对称PCR(TAIL-PCR):利用一系列序列特异性的巢式引物和一个短的任意引物引导扩增,一种半特异性的PCR。

  • 第15题:

    解释PCR、DNA—PCR、RT—PCR、原位PCR和定量PCR?


    正确答案:(1)PCR是聚合酶链反应(Polymerase chain reaction)的英文缩写,是近年来发展起来的一种在体外特异扩增某一目的DNA片段的技术。
    (2)DNA—PCR:以DNA为模板,扩增特定核苷酸序列。主要用于检测特定基因或DNA片段的存在,并常与核酸分子杂交结合,分析检定基因突变。
    (3)RT—PCR:用提取的mRNA或总RNA(含有mRNA)为模板,通过逆转录扩增cDNA。是检测特定基因表达水平的主要方法之一,也是用于鉴别、诊断RNA病毒的重要技术。
    (4)原位PCR:与原位杂交一样,原位PCR也无需提取DNA/RNA,直接用组织切片和细胞进行PCR或RT—PCR。它既能鉴定含有靶DNA/RNA序列的细胞,又能确定靶DNA/RNA序列在细胞内或染色体上的位置。
    (5)定量PCR:PCR产物经凝胶电泳分离转移膜上,与放射性核素或化学发光标记的核酸探针杂交。根据放射自显影或化学发光后底板爆光的强弱,用密度计扫描定量。此法在基因诊断中应用甚广。

  • 第16题:

    能对未知序列进行扩增的PCR是()

    • A、多重PCR
    • B、巢式PCR
    • C、原位PCR
    • D、反向PCR
    • E、不对称PCR

    正确答案:D

  • 第17题:

    对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是()

    • A、通用引物-PCR方法(general primermediated  PCR,CJP-PCR)
    • B、多重PCR(multiplexPCR)
    • C、套式PCR(nestcdprimers-polymerasc  chain reaction,NP-PCR)
    • D、AP-PCR方法(arbitrarily primcdPCR)
    • E、原位PCR技术(in situPCR,ISPCR)

    正确答案:C

  • 第18题:

    可以产生大量单链DNA的PCR技术称作()。

    • A、共享引物PCR
    • B、不对称PCR
    • C、彩色PCR
    • D、定量PCR
    • E、差异显示PCR

    正确答案:B

  • 第19题:

    能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为()。

    • A、普通PCR仪
    • B、梯度PCR仪
    • C、原位PCR仪
    • D、荧光PCR仪
    • E、实时PCR仪

    正确答案:C

  • 第20题:

    单选题
    应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪()。
    A

    普通PCR仪

    B

    梯度PCR仪

    C

    原位PCR仪

    D

    荧光PCR仪

    E

    实时PCR仪


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    单选题
    对于极微量的靶序列的扩增可以采用下列哪种PCR技术?()
    A

    AP-PCR方法(arbitrarily  primed  PCR)

    B

    通用引物-PCR方法(general  primer-mediated  PCR,GP-PCR)

    C

    套式PCR(nested  primers-polymerase  chainreaction,NP-PCR)

    D

    多重PCR(multiplexPCR)

    E

    原位PCR技术(in  situ PCR,ISPCR)


    正确答案: A
    解析: 通用引物-PCR方法利用合成的通用引物,进行PCR反应,具有广谱检测优势,阳性率远远高于特异性引物PCR法,便于临床诊断中大量标本筛检,大范围内的流行病学调查。多重PCR则是用几对引物在同一个PCR反应体系中进行扩增。这样可以同时扩增出几个不同专一靶区域的片段。套式PCR要设计“外引物”及“内引物”两对引物进行连续两次PCR,可以提高PCR检测的灵敏度和特异性。对于极微量的靶序列,一次扩增难以取得满意的效果,应用套式PCR技术可获得良好的结果。AP-PCR方法,可快速地从两个或更多的个体组织细胞中分离出差异基因或基因差异表达产物。原位PCR技术能在细胞涂片和组织切片上对待检的低拷贝或单拷贝数基因进行扩增。

  • 第22题:

    单选题
    对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是()
    A

    通用引物-PCR方法(general primermediated  PCR,CJP-PCR)

    B

    多重PCR(multiplexPCR)

    C

    套式PCR(nestcdprimers-polymerasc  chain reaction,NP-PCR)

    D

    AP-PCR方法(arbitrarily primcdPCR)

    E

    原位PCR技术(in situPCR,ISPCR)


    正确答案: B
    解析: 通用引物PCR方法利用合成的通用引物,进行PCR反应,具有广谱检测优势,阳性率远远高于特异性引物PCR法,便于临床诊断中大量标本筛检,大范围内的流行病学调查。多重PCR则是用几对引物在同一个PCR反应体系申进行扩增。这样可以同时扩增出几个不同专一靶区域的片段。套式PCR要设计“外引物”及“内引物”两对引物进行连续两次PCR,可以提高PCR检测的灵敏度和特异性。对于极微量的靶序列,一次扩增难以取得满意的效果,应用套式PCR技术可获得良好的结果。AP-PCR方法,可快速地从两个或更多的个体组织细胞中分离出差异基因或基因差异表达产物。原位PCR技术能在细胞涂片和组织切片上对待检的低拷贝或单拷贝数基因进行扩增。

  • 第23题:

    填空题
    用不对称 PCR 合成单链 DNA探针时,两个引物的浓度比为:()。

    正确答案: 50:1—100:1
    解析: 暂无解析

  • 第24题:

    单选题
    能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为()。
    A

    普通PCR仪

    B

    梯度PCR仪

    C

    原位PCR仪

    D

    荧光PCR仪

    E

    实时PCR仪


    正确答案: A
    解析: 暂无解析