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PCR-SSP序列特异性引物PCR(名词解释)

题目

PCR-SSP序列特异性引物PCR(名词解释)

相似考题

1.关于PCR技术的扩展，下列叙述错误的是A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物，同时扩增一份DNA样品中的不同序列B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率，但PCR特异性降低C、利用反向PCR，可以扩增已知序列区间以外的序列D、利用不对称PCR，可以获得大量单链DNAE、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列，这种PCR常用于细菌学鉴定，确定同一种细菌的不同种类

2.巢式PCR与普通PCR不同的是A、普通PCR比巢式PCR特异性高B、酶不同C、底物不同D、模板不同E、前者用2对引物，后者用1对引物

3.PCR技术中，扩增引物的设计无需考虑A、引物长度B、靶序列长度C、引物二聚体形成D、引物自身杂交E、引物3′端内的已知靶序列或未知靶序列

4.有关组特异性测序引物技术描述错误的是A、实验中选择特异性测序引物进行测序反应B、利用等位基因核苷酸碱基序列差异性设计测序引物C、测序反应引物只与其中一个等位基因的序列互补D、测序得到序列为与引物不互补的某个特定等位基因的序列E、常用于PCR-SBT方法中模棱两可结果的区分

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  • 第1题：

    HIA基因分型法最常用的方法有

    A.PCR扩增产物直接测序
    B.DDGE
    C.PCR-SSCP
    D.DNA-RFLP
    E.PCR-序列特异性引物(sequene specific primer，SSP)分型法

    答案：E
    解析：

  • 第2题：

    PCR引物设计 选择一条具有完整编码区（CDS）的mRNA序列（每人1题），要求分析的序列含有5'-UTR、CDS及3'-UTR。 设计该基因的1对qPCR引物，扩增的PCR长度介于100-150 bp，引物长度介于19-21 bp；设计1对扩增CDS编码区的PCR引物，引物长度介于22-23 bp。 要求列出所分析序列的序列号，作业以PDF格式提交。


    1、引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃，影响产物的生成。 2、引物的碱基尽可能随机，避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积现象。3’端不应有连续3个G和C。否则会使引物和模板错误配对。G+C含量一般占45％-55％。3’端和5’端引物具有相似的Tm值，Tm值计算公式：Tm＝4（G+C.+2（A+T） 3、引物自身不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构。引物的连续互补序列，一般不超过3bp。 4、两个引物之间不应存在互补序列，尤其应避免3’端的互补重叠。 5、引物与非特异扩增区的序列的同源性不超过70％，引物3’末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列，否则易导致非特异性扩增。 6、引物3’端碱基是引发延伸的起点，因此一定要与模板DNA配对。引物3’端最佳碱基选择是G和C，形成的碱基配对比较稳定。 7、引物与模板结合时，引物的5’端最多可以游离十几个碱基而不影响PCR反应的进行。 8、引物的5’端可以修饰，如附加限制酶位点，引入突变位点，用生物素、荧光物质、地高辛标记其它短序列包括起始密码子、终止密码子等。

  • 第3题：

    引物设计需要考虑以下因素（）。

    A．PCR产物片段大小

    B．引物Tm值

    C．引物所在区段

    D．引物序列长度


    PCR产物片段大小;引物Tm值;引物所在区段;引物序列长度

  • 第4题：

    22、引物设计需要考虑以下因素（）。

    A．PCR产物片段大小

    B．引物Tm值

    C．引物所在区段

    D．引物序列长度


    PCR产物片段大小;引物Tm值;引物所在区段;引物序列长度

  • 第5题：

    53、设计PCR引物时候，序列长度尽可能长。


    错误

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