革兰氏染色法在微生物学中有何重要意义？试述革兰氏染色法的基本步骤，并通过比较革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌细胞壁的异同，解释革兰氏染色法的原理。

第1题：

第2题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）、（）、（）和（）。

正确答案:结晶紫初染；碘液媒染；95%乙醇脱色；稀释复红或沙黄复染

第3题：

革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌相比，最大的区别是（）。

• A、革兰氏阳性细菌有线粒体，而革兰氏阴性细菌没有
• B、革兰氏阳性细菌有核糖体，而革兰氏阴性细菌没有
• C、革兰氏阳性细菌有荚膜，而革兰氏阴性细菌没有
• D、革兰氏阳性细菌有坚韧而厚度较高的细胞壁，革兰氏阴性细菌没有

正确答案:D

第4题：

下列哪种染色方法能够将细菌区别为革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌（）

• A、革兰氏染色法
• B、瑞氏染色法
• C、抗酸染色法
• D、姬姆萨染色法
• E、柯兹洛夫斯基染色

正确答案:A

第5题：

何谓革兰氏染色法？它在理论与实践方面有何重要意义？

正确答案: 丹麦学者C.Gram1884年发明的一种重要的细菌染色法。其简要操作步骤：结晶紫初染，碘液媒染，乙醇脱色和沙黄复染。其中乙醇脱色是实验成败的关键。经染色后菌体呈蓝紫色者为G+菌，红色者为G-菌。
此法可将几乎所有的细菌分为G+和G-两大类，因此是菌种分类鉴定的重要指标；同时可在一定程度上反映出这两大类细菌之间某些重要的生物学特性方面的明显差异，如细菌的结构、组成成分、生态和对药物敏感性等。

第6题：

革兰氏阳性细菌细胞壁的主要成分为（）和（），而革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分则是（）、（）、（）和（）。

正确答案:肽聚糖、磷壁酸、脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖

第7题：

革兰氏染色法包括哪几个基本步骤？你认为影响革兰氏染色结果正确性的关键环节是什么？

正确答案: 革兰氏染色法的基本步骤是：先用初染剂草酸铵结晶紫进行初染，再用媒染剂碘液媒染，然后用脱色剂乙醇处理，最后用复染剂石炭酸复红或番红进行复染。经此法染色后，若细菌不被酒精脱色，能保持结晶紫与碘的复合物而呈现蓝紫色，则该菌称为革兰氏阳性细菌（G+）；反之，若细菌能被酒精脱色，而被复红或番红复染成红色，则称之为革兰氏阴性细菌（G-）。被普遍采用的经Hucker氏改良的革兰氏染色法，其操作步骤为：制片→初染→媒染→脱色→复染→干燥→观察。影响革兰氏染色结果正确性的关键环节是用脱色剂乙醇处理，为了保证革兰氏染色结果的正确性，必须控制乙醇脱色时间，尽量采用规范的染色方法。

第8题：

革兰氏染色法经乙醇脱色、复染步骤后革兰氏阴性菌（）

• A、呈现兰紫色
• B、呈现红色
• C、呈现无色
• D、呈现绿色

正确答案:B

第9题：

比较革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和抗酸细菌的细胞壁。

正确答案: 革兰氏阳性菌的细胞壁有相当厚度的肽聚糖层，约占细胞壁的60-90%。肽聚糖层与细胞膜的外表面紧密相连。另含有少量磷壁酸，一般含蛋白质及脂类较少。缺少外膜和周质空间，消化酶酶类并不是保留在周质间隙中，而是被释放到周围环境中。
革兰氏阴性菌的细胞壁比革兰氏阳性菌的薄，但更复杂。细胞壁中只有10-20%是肽聚糖，其余是大量的脂蛋白和脂多糖。细胞壁外有一层外膜，构成了细胞壁的外表面，并留下一个非常狭窄的周质间隙。细胞壁的内表面与细胞膜之间被一个较宽的周质间隙隔开。毒素和酶在周质间隙中保持一定浓度。
抗酸细菌的细胞壁像革兰氏阳性菌一样比较厚，但其中含有60%的脂，而肽聚糖含量很少。

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

革兰氏阳性细菌细胞壁化学成分主要是（），革兰氏阴性细菌细胞壁化学成分主要是（）。

正确答案:肽聚糖；脂多糖（脂肪层）

第14题：

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成部分，外毒素是由革兰氏阳性细菌产生的。

正确答案:正确

第15题：

革兰氏染色法的原理主要与细菌细胞壁结构及化学组成有关。

正确答案:正确

第16题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）

正确答案:结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色、稀释复红或沙黄复染

第17题：

革兰氏染色法染色呈红色的是（）性细菌。

正确答案:革兰氏阴性菌

第18题：

革兰氏染色法的意义（）。

• A、鉴别细菌，革兰氏染色可将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类
• B、与致病性有关，大多数革兰氏阳性菌以外毒素为主要致病物质，而革兰氏阴性菌主要以内毒素致病，二者致病机制各不相同
• C、选择抗菌药物，大多数革兰氏阳性菌对青霉素、头孢菌素、龙胆紫等敏感，大多数革兰氏阴性菌对氨基糖苷类抗生素，如链霉素、庆大霉素等敏感

正确答案:A,B,C

第19题：

什么是革兰氏染色法？其基本原理及操作步骤怎样？

正确答案: 1884年，丹麦医生革兰氏（Gram）发明了一种重要的细菌鉴别染色法称革兰氏染色法（Gramstain）。该染色法的步骤是：（1）先用结晶紫液初染；（2）再用碘液媒染（与结晶紫形成不溶于水的复合物）；（3）接着用95%乙醇进行脱色；（4）最后再用番红（沙黄）液复染。经过这种染色方法可以将所有细菌基本上区分为两大类：革兰氏阳性细菌（GrampositivebacteriA.：原经（1）（2）步已染上的紫色复合物不被乙醇洗脱仍保持紫色，称革兰氏阳性（G+）。革兰氏阴性细菌（GramnegativebacteriA.：原已染上的紫色复合物易被乙醇洗脱，又变成无色菌体最后则被番红复染而呈红色，称革兰氏阴性（G—）。革兰氏染色反应机理：一般认为，革兰氏阳性细菌细胞壁较厚而紧密，肽聚糖网层次多、交联致密，不含类脂质。当用乙醇脱色时，因失水而引起肽聚糖层网格结构的孔径缩小乃至关闭，阻止了结晶紫—碘复合物的洗脱，故菌体最后仍呈紫色或紫红色；相反，革兰氏阴性细菌因其细胞壁薄，外膜层的类脂含量高，而肽聚糖层薄和交联度差，当乙醇脱色时，外膜层的物质迅速被溶解，通透性增大，结晶紫—碘复合物被抽提洗脱，细胞褪成无色，再经沙黄等红色染料复染，结果阴性菌呈现红色。

第20题：

革兰氏染色法经乙醇脱色、复染步骤后革兰氏阳性菌（）

• A、呈现兰紫色
• B、呈现红色
• C、呈现无色
• D、呈现绿色

正确答案:A

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：