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影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？（D ) （1） 外源基因的拷贝数 （2） 外源基因的表达效率 （3） 表达产物的稳定性 （4） 细胞的代谢负A．（1）(3)B．(2)(4)，C．(1)(2)，D．(1)(2)(3)(4)

题目

影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？（D ) （1） 外源基因的拷贝数 （2） 外源基因的表达效率 （3） 表达产物的稳定性 （4） 细胞的代谢负

A．（1）(3)

B．(2)(4)，

C．(1)(2)，

D．(1)(2)(3)(4)

相似考题

1.外源基因的高效表达会影响宿主细胞正常的生长代谢。()此题为判断题(对，错)。

2.试述外源基因表达产物的检测方法。

3.转基因植物中外源基因的存在问题：外源基因在后代中的遗传多样性和外源基因在后代中表达的（）。

4.影响外源基因在大肠杆菌中高效表达的因素有哪些?

参考答案和解析
( 1 )外源基因的剂量 ( 2 )外源基因的表达的表达效率 ( 3 )表达产物的稳定性 ( 4 )细胞的代谢负荷 ( 5 )工程菌的培养条件
更多“影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？（D ) （1） 外源基因的拷贝数 （2） 外源基因的表达效率 （3） 表达产物的稳定性 （4） 细胞的代谢负”相关问题

  • 第1题：

    外源基因在原核细胞中表达，常用的启动子有（）、（）、（）、（）、（）和（）。


    正确答案:乳糖启动子；Trp启动子；Tac启动子；噬菌体的PL；PR启动子；脂蛋白启动子

  • 第2题：

    提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。

    • A、调整SD序列与ATG之间的距离
    • B、用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子
    • C、增加mRNA的稳定性
    • D、使细菌的生长与外源基因的表达分开
    • E、提高表达蛋白的稳定性

    正确答案:A,B,C,D,E

  • 第3题：

    影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素有哪些？


    正确答案: 1、启动子的强弱；
    2、基因的剂量；
    3、影响RNA转录和翻译效率的因素：SD序列、mRNA；
    4、外源基因密码子的选择；
    5、表达产物的大小；
    6、表达产物的稳定性。

  • 第4题：

    利用基因动物作为外源基因的表达系统与体外细胞表达系统相比有什么优点？


    正确答案: 在体外细胞表达系统中基因产物的产量通常较低，特别是跨膜蛋白，因为它在转染细胞的膜上积累，从而妨碍蛋白的进一步积累，而在乳液分泌中，乳腺细胞中合成的脂被质膜包在囊内，然后一起以球状颗粒的形式分泌到乳液中。利用这一原理，蛋白质的产量提高，而且浓缩纯化也更加容易。

  • 第5题：

    简述使外源基因在宿主细胞中顺利表达的两种方法


    正确答案: （1）在形成重组DNA分子时，在载体的启动基因顺序和核糖体结合顺序后面的适当位置上连接外源基因。
    （2）将外源基因插入到载体的结构基因中的适当位置上，转录和翻译的结果将产生一个融合蛋白。这种蛋白质被提纯后，要准确地将两部分分开，才能获得所需的蛋白质

  • 第6题：

    克隆菌扩增的目的是（I增殖外源基因拷贝II表达标记基因III表达外源基因）（）

    • A、I+II
    • B、I+III
    • C、II+III
    • D、I+II+III

    正确答案:D

  • 第7题：

    外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是（）I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离

    • A、III
    • B、I+II
    • C、I+III
    • D、II+III

    正确答案:D

  • 第8题：

    利用外源基因表达代谢酶，催化药物前体转化为细胞毒性产物，导致宿主细胞死亡的基因治疗方法是（）。

    • A、基因活化
    • B、基因灭活
    • C、自杀基因导入治疗
    • D、基因协同致死
    • E、基因增补

    正确答案:C

  • 第9题：

    外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。

    • A、②④①③⑤
    • B、①②④③⑤
    • C、②④③①⑤
    • D、④②①③⑤

    正确答案:A

  • 第10题：

    单选题
    克隆基因的大肠杆菌表达体系（　　）。
    A

    能表达外源基因的基因组DNA

    B

    只能表达外源基因的cDNA

    C

    能进行转录后加工

    D

    能进行翻译后加工

    E

    表达产物一般是可溶性的包涵体


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    填空题
    在大肠杆菌中，外源基因表达产物的主要形式为（）和（）。

    正确答案： 可溶性蛋白,不溶性蛋白
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    利用基因动物作为外源基因的表达系统与体外细胞表达系统相比有什么优点？

    正确答案： 在体外细胞表达系统中基因产物的产量通常较低，特别是跨膜蛋白，因为它在转染细胞的膜上积累，从而妨碍蛋白的进一步积累，而在乳液分泌中，乳腺细胞中合成的脂被质膜包在囊内，然后一起以球状颗粒的形式分泌到乳液中。利用这一原理，蛋白质的产量提高，而且浓缩纯化也更加容易。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    在大肠杆菌中，外源基因表达产物的主要形式为（）和（）。


    正确答案:可溶性蛋白；不溶性蛋白

  • 第14题：

    真核细胞表达外源基因的条件是什么？


    正确答案: 1、首先必须具备哺乳动物细胞表达的功能元件。要求哺乳动物细胞表达载体带有能在真核细胞中表达外源基因的真核转录调控元件；
    2、注意选择转染的受体细胞，不同类型的细胞具有不同的特性；
    3、注意选择适当的选择标记。

  • 第15题：

    大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件有哪些？


    正确答案: 1、要求外源基因的编码区不能含有内含子；
    2、表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游，并形成正确的阅读框架；
    3、转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16SrRNA3末端相匹配的SD序列，才能被有效的翻译成蛋白质。
    4、蛋白产物必须稳定，不易被细胞内蛋白酶快速降解，且对宿主无害。

  • 第16题：

    影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素.


    正确答案: 1.外源基因的拷贝数2.外源基因的表达效率3.表达产物的稳定性4.细胞的代谢负荷

  • 第17题：

    如何有效地提高外源基因的表达效率？


    正确答案: ⑴提高启动子强度
    ⑵缩短启动子同克隆基因间距离
    ⑶高效的翻译起始序列
    ⑷高效的转录终止区
    ⑸提高质粒拷贝数及稳定性
    ⑹用以下方法提高翻译水平：
    ①调整SD序列与AUG间的距离
    ②用点突变的方法改变某些碱基
    ③增加mRNA的稳定性的
    ⑺减轻细胞的代谢负荷：
    ①诱导表达
    ②表达载体的诱导复制
    ⑻提高表达蛋白的稳定性，防止其降解：
    ①克隆一段原核序列，表达融合蛋白
    ②采用某种突变菌株
    ③表达分泌蛋白质

  • 第18题：

    外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是（） I融合基因能稳定扩增；II融合蛋白能抗蛋白酶的降解；III表达产物易于亲和层析分离

    • A、III
    • B、I+II
    • C、I+III
    • D、II+III
    • E、I+II+III

    正确答案:D

  • 第19题：

    大肠杆菌作为外源基因表达系统有哪些优缺点？


    正确答案: 优势：
    ①遗传背景清楚：全基因组测序，共有4405个开放型阅读框架；
    ②繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定；
    ③基因克隆表达系统成熟完善；
    ④目标基因表达水平高；
    ⑤代谢途径和基因表达调控机制比较清楚
    缺点：
    ①缺乏对真核生物蛋白质的复性功能；
    ②缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统；
    ③内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白；
    ④细胞周质内含有种类繁多的内毒素。

  • 第20题：

    提高外源基因表达水平的措施有哪些？


    正确答案: （1）提高翻译水平
    ①调整SD序列与ATG之间的距离。
    ②用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子。
    ③增加mRNA的稳定性。
    （2）使细菌的生长与外源基因的表达分开
    将宿主菌的生长和外源基因的表达分成两个阶段，是减轻宿主细胞代谢负荷最为常用的一个方法。常采用温度诱导或药物诱导基因表达。
    （3）提高表达蛋白的稳定性
    在大肠杆菌中表达的外源蛋白往往不够稳定，易被细胞的蛋白酶降解，因而会使外源基因的表达水平大大降低。因此，提高表达蛋白的稳定性，防止细菌蛋白酶的降解是提高外源基因表达水平的有力措施。
    ①表达融合蛋白。②采用某种突变菌株，可使大肠杆菌蛋白酶合成受阻，从而使表达蛋白得到保护，不被降解。③表达分泌蛋白。

  • 第21题：

    产人胰岛素的大肠杆菌（）。

    • A、是一种工程菌，属于原核生物
    • B、细胞的基本代谢有别于一般的大肠杆菌
    • C、细胞内没有人胰岛素基因表达产物加工系统
    • D、外源基因在细胞质表达

    正确答案:A,C,D

  • 第22题：

    问答题
    试述外源基因表达产物的检测方法。

    正确答案： （一）特异性mRNA的检测
    Northern杂交，即RNA-DNA杂交分析，是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似，检测目的RNA的存在与否及含量。
    （二）报告基因的酶法检测
    （1）报告基因：其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在；其表达产物便于检测。
    （2）目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因，主要有：β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）、氯霉素乙酰转移酶基因（CAT基因）、胸苷激酶基因（cA）、二氢叶酸还原酶基因（DHFR）等。
    （三）免疫学检测
    （1）免疫沉淀法
    （2）酶联免疫吸附法（ELISA）
    ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液－液抗原－抗体反应体系不同之处是建立了固－液抗原－抗体反应体系，并采用酶标记。抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性；抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后，结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时，可以催化底物的水解、氧化或还原，从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
    （3）Western印迹法
    （4）固相放射免疫（RIA）法
    RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度，可检测出1pg的靶蛋白。
    （四）表达产物的生物学活性检测
    当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时，可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有：淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    多选题
    提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。
    A

    调整SD序列与ATG之间的距离

    B

    用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子

    C

    增加mRNA的稳定性

    D

    使细菌的生长与外源基因的表达分开

    E

    提高表达蛋白的稳定性


    正确答案： E,D
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    问答题
    简述使外源基因在宿主细胞中顺利表达的两种方法

    正确答案： （1）在形成重组DNA分子时，在载体的启动基因顺序和核糖体结合顺序后面的适当位置上连接外源基因。
    （2）将外源基因插入到载体的结构基因中的适当位置上，转录和翻译的结果将产生一个融合蛋白。这种蛋白质被提纯后，要准确地将两部分分开，才能获得所需的蛋白质
    解析： 暂无解析

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