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PCR的主要步骤不包括()A.设计一对特异性引物B.95℃使模板DNA变性C.降温到合适的温度时使模板DNA与引物杂交D.DNA聚合酶在dNTP存在时,进行延伸E.加热使DNA聚合酶失活

题目
PCR的主要步骤不包括()

A.设计一对特异性引物

B.95℃使模板DNA变性

C.降温到合适的温度时使模板DNA与引物杂交

D.DNA聚合酶在dNTP存在时,进行延伸

E.加热使DNA聚合酶失活


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参考答案和解析
正确答案:E
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  • 第1题:

    简述PCR的主要步骤及其影响因素。


    P.CR是一种体外酶促扩增特异DNA片段的技术,其原理类似DNA的体内扩增。它包括:PCR包括三个基本过程:①变性(denaturation),即在较高温度(93℃~98℃)使双链模板DNA变性解链成单链DNA,以提供复制的模板; ②退火(annealing),即在较低温度(37℃~65℃)使加入的引物与待扩增DNA区域特异性地结合,以提供DNA复制起始的3′―OH; ③延伸(extension),即在适当的温度(70℃~75℃)下,DNA聚合酶从特异性结合到DNA模板上的引物3′-OH端开始,根据碱基互补配对原则,按照待扩增区域的核苷酸序列,进行DNA链的延伸,即合成新的DNA分子。这三个过程组成一个循环周期;每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板,如此循环往复,经过n轮循环后,靶DNA的拷贝数理论上呈2n增长。 影响PCR反应的因素主要有:引物、TaqDNA聚合酶、dNTP、模板和Mg2+离子,此外,pH、温度、循环次数也会影响PCR反应。

  • 第2题:

    【填空题】PCR的基本反应步骤包括 、 、 3个步骤。


    变性退火延伸

  • 第3题:

    2、PCR过程的步骤不包括以下哪项()?

    A.变性

    B.转录

    C.退火

    D.延伸


    转录

  • 第4题:

    PCR反应技术全过程由 、 三个步骤组成


    B

  • 第5题:

    简述 PCR技术的操作步骤。


    标准的PCR过程分为三步: D.NA变性:(90℃-96℃)双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA 退火:(25℃-65℃)系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。 延伸:(70℃-75℃)在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的3′端→5′端延伸,合成与模板互补的DNA链。