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  • 第1题:

    2、请简述制备转基因动物的主要技术以及方法


    转基因动物培育的基本原理是借助分子生物学和胚胎工程的技术,将外源目的基因在体外扩增和加工,再导入动物的早期胚胎细胞中,使其整合到染色体上,当胚胎被移植到代孕动物的输卵管或子宫后,发育成携带外源基因的转基因动物。 培育转基因的关键技术包括外源目的基因的制备、外源目的基因的有效导入、胚胎培养与移植、外源目的基因表达检测等。根据目的基因导入的方法与对象不同,培育转基因动物的主要方法有基因显微注射法、逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法、精子载体导入法、YAC介导的基因转移和细胞核移植技术。 转基因动物在生物学基础研究、医学、农业及生物工程等领域的应用已经取得有相当价值的成果。主要应用包括:①改良动物品种;②生物制药;③基因治疗;④基因打靶。

  • 第2题:

    胚胎嵌合技术可制备转基因动物。


    正确

  • 第3题:

    转基因动物制药技术的基本原理是什么?


    转基因动物是通过基因工程对DNA进行体外操作,添加或删除一个特殊的DNA序列,然后导入早期的胚胎细胞中,产生遗传结构得以修饰的动物,其改变的性状可以遗传给后代,这些“NewAnimal”统称为转基因动物。 转基因动物基本原理:是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或者着床前胚胎细胞,然后将此受精卵或着床前胚胎细胞再植入受体动物的输卵管或子宫中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,人们可以通过分析转入基因和动物表型的关系,从而揭示外源基因的功能,也可以通过转入外源基因培育优良品种的工程动物等。 转基因动物用途:改良动物品种和生产性能,生产人药用蛋白和营养保健蛋白,生产人用器官移植的异种供体,建立疾病和药物筛选模型,生产新型生物材料,建立诊断、治疗人类疾病及新药筛选的动物模型。

  • 第4题:

    利用体细胞克隆技术制备转基因动物,转基因动物阳性率可达到

    A.大于10%;

    B.小于10%;

    C.100%;

    D.50%。


    100%

  • 第5题:

    说明制备转基因动物的常用方法和优缺点。


    六种方法: (1)原核期胚胎的显微注射技术,优点:有外源基因长度不受限制,可直接用不含原核载体DNA片段的外源基因进行转移;实验周期相对较短。缺点:大动物原核胚的胚胎胞质中含有大量的泡状颗粒,影响其透光性,且显微操作技术含量较高,需要特殊的仪器并可能在注射过程中对胚胎造成损伤等;外源基因能否整合到受体基因组中,要等到子一代出生后经过选择才能确定,这对生育周期长,产仔少的大动物来说,效率就很低,而且整合位点随机,易造成宿主基因组内生命活动所必需的基因失活和导致胚胎或动物死亡;整合一般是指多拷贝首尾串联相接,不利于研究基因结构、功能及表达调控。 (2)反转录病毒技术,优点:感染率高,易转染,操作简单,而且多数为单拷贝,并可稳定的整合到可识别插入位点。缺点:反转录病毒作为载体,其插入的外源基因最大不能超过10KB,并且容易产生嵌合体。另外,插入的外干扰源基因容易丢失,反转录病毒本身的DNA序列也会干扰外源基因的表达。还有反转录病毒在安全方面仍存在问题。 (3)慢病毒载体技术,优点:高效的转染率和转基因的高表达。缺点:插入外源基因需小于8.5kb和插入突变,经传代整合后所得原病毒DNA易发生甲基化,影响外源基因表达。 (4)精子载体技术,优点:简单易行,直接可以用精子作为外源DNA载体进行基因转移。可以对大量的精子细胞进行处理,不损伤卵母细胞,在短时间内生产转基因胚胎,而且整合率高,成本低。缺点:结果不稳定,有的外源DNA并未整合到宿主的基因组中,而是以附加体的形式存在于染色体之外,由于存在于正常的细胞有丝分裂中,附加体丢失的概率很高。 (5)体细胞核移植转基因技术,优点:动物转基因效率大幅提高,体细胞克隆技术可将基因整合和生产胚胎分开操作,有利于使用基因打靶技术。缺点:克隆技术的效率有待提高。 (6)胚胎干细胞介导技术,优点:可以将外源基因整合到细胞的染色体组中,然后把这些干细胞经过筛选,找到理想的干细胞,大大减少了整合突变率,还可以消除随机整合产生的位置效应的影响。