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Ames实验原理，常用菌株及其鉴定方法？

题目

Ames实验原理，常用菌株及其鉴定方法？

相似考题

1.Ames试验常用的实验菌株是( )A.鼠伤寒沙门菌B.大肠埃希菌C.铜绿假单胞菌D.结核杆菌E.真菌

2.Ames试验菌株鉴定的内容是什么？

3.Ames试验菌株鉴定实验包括哪些内容？

4.Ames试验最常用的实验方法是A、共培养法B、预培养法C、平板掺入法D、点试法E、突变法

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  • 第1题：

    毒理学实验中，Ames试验的指示菌株是（）。

    • A、鼠伤寒沙门菌的野生型菌株
    • B、鼠伤寒沙门菌的色氨酸突变型菌株
    • C、鼠伤寒沙门菌的组氨酸突变型菌株
    • D、大肠杆菌的野生型菌株
    • E、大肠杆菌的色氨酸突变型菌株

    正确答案:C

  • 第2题：

    简述Ames实验原理。


    正确答案: 第二阶段：遗传毒性试验、传统致畸试验和短期喂养试验。遗传毒性检验的首要目的是确定被检化学物质诱导受试物发生突变的可能性。以致突变试验来定性表明受试物是否有突变作用或潜在的致癌作用。致突变试验一般首选鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验，即Ames试验。
    鼠伤寒沙门氏菌的突变型（即组氨酸缺陷型）菌株在无组氨酸的培养基上不能生长，在有组氨酸的培养基上可以正常生长。但如在无组氨酸的培养基中有致突变物存在时，则沙门氏菌突变型可回复突变为野生型（表现型），因而在无组氨酸培养基上也能生长，故可根据菌落形成数量，检查受试物是否为致突变物。

  • 第3题：

    试述Ames试验的原理。 


    正确答案:B．N．Ames等经十余年努力，于1975年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验，亦称Ames试验。该法比较快速、简便、敏感、经济，且适用于测试混合物，反映多种污染物的综合效应。Ames试验的原理是： 鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的组氨酸营养缺陷型（his－）菌株，在含微量组氨酸的培养基中，除极少数自发回复突变的细胞外，一般只能分裂几次，形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后，大量细胞发生回复突变，自行合成组氨酸，发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经代谢活化才有致变作用，在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶，可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。 鉴于化学物质的致突变作用与致癌作用之间密切相关，故此法现广泛应用于致癌物的筛选。

  • 第4题：

    什么是定位突变，常用的定位突变方法及其原理。


    正确答案: （1）定位突变：定位突变是在已知蛋白质结构与功能的基础上，在已知DNA序列中取代、插入或删除选定的核苷酸，从而产生具有新性状的突变蛋白质分子的一种蛋白质工程技术。
    （2）
    ①寡核苷酸引物介导的定位突变：用含有突变碱基的寡核苷酸片段作引物，在聚合酶的作用下启动DNA分子进行复制。包括：Kunkel突变法、基于抗生素的“抗性恢复”突变法、基于去除特定限制酶切点的突变法
    ②PCR介导的定位突变法：利用PCR将插入和缺失的突变碱基均设计在引物中，先用两对引物分别对核酸进行PCR扩增，通过重叠延伸产生带有部分重叠序列的两种PCR产物，这些产物经过混合、变性、复性和链延伸后，再用一对与两个待接片段外侧互补的引物进行第二次扩增，从而产生全长的异源杂合双链DNA。
    ③盒式突变：又称片段取代法，利用目标基因序列中适当限制酶切位点，插入各种合适的突变DNA片段，用以取代目标基因中特定DNA片段。包括盒式取代诱变和混合寡核苷酸诱变两种方式。

  • 第5题：

    在对Ames试验的标准菌株进行基因型鉴定时，无论营养肉汤琼脂培养基是否经过紫外线照射，（）都能在平板上生长。

    • A、TA97菌株
    • B、TA98菌株
    • C、TAl00菌株
    • D、TAl02菌株

    正确答案:D

  • 第6题：

    Ames试验所用沙门氏菌试验菌株一般毒性较低，具有R因子的危害更小，因此对Ames试验的废弃物不需要采取特别处理。


    正确答案:错误

  • 第7题：

    在对Ames试验的标准菌株进行生物学特性鉴定时，TA98菌株的自发回变菌落数应在（）之间。

    • A、90～180
    • B、30～50
    • C、120～200
    • D、240～320

    正确答案:B

  • 第8题：

    单选题
    毒理学实验中，Ames试验的指示菌株是（）。
    A

    鼠伤寒沙门菌的野生型菌株

    B

    鼠伤寒沙门菌的色氨酸突变型菌株

    C

    鼠伤寒沙门菌的组氨酸突变型菌株

    D

    大肠杆菌的野生型菌株

    E

    大肠杆菌的色氨酸突变型菌株


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    Ames试验常用的实验菌株是（　　）。
    A

    铜绿假单胞菌

    B

    结核杆菌

    C

    大肠埃希菌

    D

    鼠伤寒沙门菌

    E

    真菌


    正确答案： B
    解析：
    鼠伤寒沙门氏菌是Ames试验常用的实验菌株。

  • 第10题：

    单选题
    在对Ames试验的标准菌株进行基因型鉴定时，（）不会在组氨酸营养缺陷鉴定试验中被使用。
    A

    L-盐酸组氨酸溶液

    B

    D—生物素溶液

    C

    氨苄青霉素溶液

    D

    组氨酸-生物素平板


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    Ames试验最常用的实验方法是（）。
    A

    共培养法

    B

    预培养法

    C

    平板掺入法

    D

    点试法

    E

    突变法


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    在对Ames试验的标准菌株进行生物学特性鉴定时，TA98菌株的自发回变菌落数应在（）之间。
    A

    90～180

    B

    30～50

    C

    120～200

    D

    240～320


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    Ames试验常用的实验菌株是（）。

    • A、鼠伤寒沙门菌
    • B、大肠埃希菌
    • C、铜绿假单胞菌
    • D、结核杆菌
    • E、真菌

    正确答案:A

  • 第14题：

    简述常用目的基因制备的方法及其原理？


    正确答案:生物学方法；化学合成法；基因文库法；利用PCR扩增法。
    原理：
    ①生物学方法是采用基因工程手段把染色体DNA用限制内切酶切割，将所有片段都连接到某种载体上，转入大肠杆菌中增殖，再用适当方法来筛选含该基因的重组体菌落，从重组题细菌提取DNA，经酶切后得到目的基因。
    ②化学合成法是以单核苷酸为原料，在体外用化学方法按照已知基因的碱基序列，先合成DNA短片段，再依次连接而成完整的目的基因链。
    ③基因文库法是将某种生物全部基因组的遗传信息，贮存在可以长期保存的稳定重组体中，以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因。
    ④利用PCR扩增法是在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下，利用DNA聚合酶催化合成反应，体外扩增特异DNA片段。

  • 第15题：

    ONPG试验主要用于（）。

    • A、迟缓发酵木糖菌株的快速鉴定
    • B、迟缓发酵蔗糖菌株的快速鉴定
    • C、迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定
    • D、快速发酵木糖菌株的鉴定
    • E、快速发酵乳糖菌株的鉴定

    正确答案:C

  • 第16题：

    某发酵工厂的生产菌株疑为溶源菌，试设计一个鉴定该菌株是否为溶源菌的实验方案。


    正确答案:将供试菌株制成菌悬液，置于低剂量紫外线下照射处理后，与营养琼脂培养基混匀后倒平板，经培养后观察平板上长出的菌落情况，由于溶源菌细胞内的前噬菌体经低剂量紫外线下照射处理后，会转变成裂性噬菌体，进入裂解性循环，使细胞破裂，即诱发裂解，这时便会在菌苔上形成噬菌斑。如果出现噬菌斑，则证明该菌株为溶源菌。

  • 第17题：

    在对Ames试验的标准菌株进行基因型鉴定时，（）不会在组氨酸营养缺陷鉴定试验中被使用。

    • A、L-盐酸组氨酸溶液
    • B、D—生物素溶液
    • C、氨苄青霉素溶液
    • D、组氨酸-生物素平板

    正确答案:A

  • 第18题：

    Ames试验中鉴定标准菌株时，需要检验菌株对鉴别性诱变剂的反应，这些诱变剂包括10多种致突变物，主要有哪些？


    正确答案: （1）用于点试法的鉴别性致突变物有：柔毛霉素、叠氮钠、ICR-191、丝裂霉素C、2，4，7-三硝基芴酮、4-硝基-o-苯撑二胺、4-硝基喹啉-N-氧化物、甲基磺酸甲脂、敌克松、2-氨基芴和甲基硝基亚硝基胍。
    （2）用于平板掺入法的鉴别性致突变物有：柔毛霉素、叠氮钠、ICR-191、链黑霉素、丝裂霉素C、2，4，7-三硝基芴酮、44肖基-o-苯撑二胺、4-6肖基喹啉-N-氧化物、甲基磺酸甲酯、敌克松、2—氨基芴和苯并[a]芘。

  • 第19题：

    问答题
    Ames试验菌株鉴定的内容是什么？

    正确答案： 用于Ames试验的菌株必须进行基因型、自发回复突变数、对鉴别性诱变剂的反应三个方面的鉴定。其中，基因型鉴定还包括组氨酸营养缺陷型、深粗糙型（rfA.、uvrB缺失、R因子和pAQl质粒等方面的鉴定。
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    Ames试验中鉴定标准菌株时，需要检验菌株对鉴别性诱变剂的反应，这些诱变剂包括10多种致突变物，主要有哪些？

    正确答案： （1）用于点试法的鉴别性致突变物有：柔毛霉素、叠氮钠、ICR-191、丝裂霉素C、2，4，7-三硝基芴酮、4-硝基-o-苯撑二胺、4-硝基喹啉-N-氧化物、甲基磺酸甲脂、敌克松、2-氨基芴和甲基硝基亚硝基胍。
    （2）用于平板掺入法的鉴别性致突变物有：柔毛霉素、叠氮钠、ICR-191、链黑霉素、丝裂霉素C、2，4，7-三硝基芴酮、44肖基-o-苯撑二胺、4-6肖基喹啉-N-氧化物、甲基磺酸甲酯、敌克松、2—氨基芴和苯并[a]芘。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    Ames实验原理，常用菌株及其鉴定方法？

    正确答案： 原理：组氨酸缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌在缺乏组氨酸的培养基上不能生长，但在加有突 变原的培养基上培养，则可使突变型产生回复突变成野生型，即恢复合成组氨酸的能力，能在缺乏组氨酸的培养基上生长成菌落，通过计数菌落出现数目就可以估算药物诱变性得强弱。 
    常用菌株及鉴定方法 
    1）组氨酸营养缺陷鉴定：培养基分两组，一组加入组氨酸和生物素，另一组只加入生物素。在无组氨酸的培养基中无法生存的即为组氨酸营养缺陷型菌株。 
    2）深粗糙型（rfa）鉴定：因突变型的菌株脂多糖屏障缺陷，结晶紫可进入杀灭。所以在染了结晶紫的培养基上划线接种，有益菌圈的即突变型。 
    3）uvrB缺失鉴定（紫外线敏感试验）：接种，黑纸盖一半，UV照24h，UV侧无菌生长，黑纸侧有菌生长，即为UV敏感。 
    4）R因子测定（氨苄青霉素耐药试验）：家氨苄青霉素，有抑菌圈的无抗性，无抑菌圈的有R因子。 
    5）自发回变数测定：TA97（90-180），TA98（15-60），TA100（25-200），TA102（240-360）
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    Ames试验菌株鉴定实验包括哪些内容？

    正确答案： （1）基因型鉴定
    ①组氨酸营养缺陷鉴定（组氨酸需求试验）
    组氨醛营养缺陷型菌株只能在补充有组氨酸的培养基上生长，而在无组氨酸的培养基上则不能生长。 
    ②深租糙型（rfa）鉴定（结晶紫抑菌试验）
    深租糙型突变的细菌，缺乏脂多搪屏障，因此，一些大分子物质能进入菌体。结晶紫大分子可进入菌体并杀死细菌。
    ③uvrB缺失的鉴定（紫外线敏感试验）
    UvrB缺失，即切除修复系统缺失。
    ④R因子的鉴定
    带有R因子的菌株具有抗氨苄青霉素的特性，据此以鉴别R因子之存在。菌株TA102含PAQ1质粒（含抗四环素因子），因此还应做四环素抗性试验。
    （2）自发回变数测定
    受试菌株在保存或培养过程中，能产生自发回变。不同菌株的自发回变数有一定范围。
    （3）对鉴别性致突变物的反应
    试验菌株对不同致突变物的反应不同，应该在有和没有代谢活化的条件下鉴定各试验菌株对致突变物的反应。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    在对Ames试验的标准菌株进行基因型鉴定时，无论营养肉汤琼脂培养基是否经过紫外线照射，（）都能在平板上生长。
    A

    TA97菌株

    B

    TA98菌株

    C

    TAl00菌株

    D

    TAl02菌株


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

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