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简述培养细胞的生存环境与条件。
题目
简述培养细胞的生存环境与条件。
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第1题：
在离体培养条件下，维持细胞生长与增殖的技术是（）
- A、细胞融合
- B、细胞转染
- C、细胞培养
- D、细胞杂交
- E、原代培养
正确答案:C -
第2题：
简述植物细胞培养产酶的工艺条件控制。
正确答案:一、培养基；
（1）生长和代谢需要大量无机盐；
（2）需要多种维生素和植物生长激素；
（3）需求的氮源一般为无机氮源；
（4）一般以蔗糖为碳源、浓度为2-5%。
二、培养温度和pH；
（1）适宜温度在20℃-25℃，酶合成温度因植物种类而异；
（2）要求稳定的pH，一般控制在pH5.8-6.1最好。
三、通气和搅拌；耗氧速率较慢，细胞比较大，较脆弱，对剪切力敏感，所以，通气和搅拌不能太强烈。
四、其他；
（1）光照：对一些植物酶有诱导作用或抑制作用。
（2）刺激物：在酶合成时期，适当添加。 -
第3题：
简述动物细胞培养的特点与营养需求。
正确答案:针对动物细胞培养的各种方法，相应的培养特点：
1、转瓶（管）培养系统
（特点）优点：结构简单，投资少，技术熟练，重复性好，放大只需要简单地增加转瓶（管）数量。
缺点：劳动强度大，占地空间大，单位体积提供细胞生长的表面积小，细胞生长密度低，培养时监测和控制环境条件受限制。
2、反应器贴壁培养
细胞贴附于固定的表面生长，不因为搅拌而跟随培养基一起流动。
（特点）优点：比较容易更换培养基，不需要特殊的分离和培养设备。
缺点：扩大规模较难，不能直接监控细胞生长情况。
3、悬浮培养法，主要用于非贴壁依赖型细胞的培养。如杂交瘤细胞、淋巴细胞、和许多肿瘤细胞等。
特点：用于实验室的普通悬浮反应器，是一种带有搅拌器的旋转瓶。
4、固定化培养，固定化培养是将动物细胞与非水溶性载体结合起来，在生物反应器中进行大规模培养的方法。
特点：具有细胞生长密度高，抗剪应力和抗污染能力强，细胞易与产物分开，利于产物分离和纯化。
针对与植物细胞培养的区别（即思考题7），动物细胞的培养有一下特点：
A.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）
B.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要。
C.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。
D.原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。
营养需求：
①动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。
②动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。
③动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。 -
第4题：
简述植物悬浮细胞培养的必备条件注意事项及其方法。
正确答案: 悬浮细胞培养体系必备条件：
①悬浮培养物分散性好、细胞团小；
②细胞形状和大小大致相同；
③生长迅速。悬浮细胞倍增时间为2~3d甚至更短。可直接用悬浮细胞进行原生质体分离、杂交、次生代谢物生产等。
建立悬浮细胞系注意事项：
①合适外植体；
②疏松易碎愈伤组织；
③合适培养基；
④培养液除菌；
⑤暗或弱光悬浮培养；
⑥悬浮细胞继代与选择，保留小细胞团，直到得到均一的悬浮系为止。
植物细胞悬浮培养方法：
（1）分批培养
（2）半连续培养
（3）连续培养 -
第5题：
简述动物细胞培养工艺条件的控制。
正确答案:动物细胞培养的种质细胞需要先用胰蛋白酶消化处理。
A.温度的控制：体温范围（36.5℃，波动范围在0.25℃之内），会影响CO2的溶解度进而影响PH。
B.PH的控制：微碱性范围（7.0－7.6，7.4最好），通常采用CO2和NaHCO3溶液，（改变CO2浓度会对溶解氧产生影响）并加入缓冲系统，常用指示剂为酚红（红色）。
C.溶解氧的控制：不同的细胞、不同生长阶段、不同细胞密度要求不同（过低时细胞生长受抑制，过高时对细胞产生毒害），通过调节混合气体（空气、氧气、氮气和二氧化碳）的量及其比例进行控制，CO2有调节供氧和PH的双重作用。
D.渗透压的控制：细胞内外渗透压处于等渗状态（700－850kPa）。 -
第6题：
问答题简述细胞培养目的与用途。正确答案： 药物研究与开发
（1）新药筛选：如化学合成药物药效研究，中药有效成分筛选与鉴定等.
（2）疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗，艾滋病疫苗等），肿瘤疫苗（多肽疫苗）等.
（3）基因工程药物研究与开发：如干扰素研究与开发，细胞生长因子研究与开发等.
（4）细胞工程药物研究与开发：生物活性多肽研究与开发，人参皂甙，紫杉醇等生物活性成分研究与开发.
（5）单克隆抗体制备：包括诊断用单克隆抗体，治疗用单克隆抗体.
基础研究
（1）药物作用机理
（2）基因功能
（3）疾病发生机理
生物制药
（1）疫苗生产：如病毒性疫苗（肝炎病毒疫苗，艾滋病疫苗等），肿瘤疫苗（多肽疫苗）等.
（2）基因工程药物生产：如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素，粒细胞生长因子，胸腺肽等
（3）诊断用和药用单克隆抗体生产
（4）细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等解析： 暂无解析 -
第7题：
问答题简述植物细胞培养与微生物细胞培养的不同之处。正确答案： 植物细胞培养与微生物的区别：
1.细胞的大小：植物细胞一般比微生物细胞大；
2.细胞块的形状：植物细胞为块状，而微生物细胞有球状、杆状、螺旋状等；
3.培养液的黏度：植物细胞培养液有一定的黏度；
4.需氧量：植物细胞培养的耗氧量比微生物细胞的好氧量少；
5.植物细胞的Kla值比微生物培养的Kla值小得多；
6.植物细胞对剪切力敏感；
7.植物细胞培养需CO2和光照。解析： 暂无解析 -
第8题：
问答题简述体外培养细胞对生存环境的基本要求.正确答案： ⑴细胞的营养需要：
①基本营养物质：氨基酸（12种＋谷氨酰胺）、维生素、葡萄糖、核糖、脱氧核糖等无机离子。
②促细胞生长因子：多由血清提供
⑵细胞的生存环境：
①温度条件对细胞生长的影响：不同生物来源的组织细胞培养温度不同；体外培养动物细胞最常用的温度是37℃，耐低温不耐高温。在生理温度范围内，温度与细胞生长率之间存在正相关关系。
②气相环境对细胞生长的影响：动物细胞培养的气相环境都是采用5%CO2与95%空气（提供氧）的混合气体。O2参与细胞的能量代谢过程，CO2用于维持培养液的酸碱度，一般多为开放式培养
③培养液的酸碱度对细胞生长的影响：大多数的有机体细胞能在pH6.0～8.0的环境中生存。最适宜的pH值范围是7.2～7.4。体外培养的正常细胞耐酸能力要强于耐碱能力
④无污染、无毒。解析： 暂无解析 -
第9题：
多选题选择下列正确的答案（）。A动植物细胞培养都需要无菌的条件
B动物细胞培养需要无菌的条件
C植物细胞培养需要无菌的条件
D动植物细胞培养都不需要无菌的条件
E无菌条件不利于植物细胞培养
正确答案： E,C解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述培养细胞的生存环境与条件。正确答案： 1.细胞的营养需要：
1）基本营养物质：氨基酸，维生素，葡萄糖、核糖、脱氧核糖等，无机离子等；
2）促细胞生长因子：多由血清提供。
2.细胞的生存环境
1）温度条件：不同生物来源的组织细胞培养温度不同；体外培养动物细胞最常用的温度是37℃。
2）气相环境：用5%CO2与95%空气（提供氧）的混合气体。
3）细胞生长的液相环境。
水及平衡盐溶液，三蒸水，Hanks液、PBS、Earle液天然培养基：血清、组织提取液、水解乳白蛋白合成培养基。
4）培养液的酸碱度。
大多数的有机体细胞能在pH6.0～8.0的环境中生存。最适宜的pH值范围是7.2～7.4。
5）无污染、无毒。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述动植物细胞培养的工艺条件及其控制措施？正确答案： 植物：（1）工艺流程：外植体----细胞的获取---细胞培养----分离纯化----产物（2）控制措施：a温度（一般为室温25℃）；B.pH（PH=5.0-6.0）；c通气与搅拌；d光照的控制；e前体的添加；F.诱导子的应用’
动物：（1）工艺流程：种质细胞-----（胰蛋白酶处理）-----悬浮细胞----（接入）-----培养液-----（人工控制条件）------悬浮培养----（收集）--------培养液------分离纯化------产物（2）控制措施：a温度：一般控制在36.5℃.B.pH值：一般控制在7.0-7.6的微碱性范围内。C.渗透压：应与细胞内渗透压相同。d溶解氧：根据情况随时调节。解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述植物细胞培养工艺条件的控制。正确答案： A.温度的控制：室温范围（25℃）。
B.PH的控制：微酸性范围（5－6，5.5－5.8最好）。
C.溶解氧的控制：适当的通风和搅拌。
D.光照的控制：根据植物细胞的特性及目的代谢物的种类进行调节。
E.前体的添加：添加处于目的代谢物代谢途径上游的物质可以提高次级代谢物的产量。
F.刺激素的应用：可以促使物质代谢朝某些次级代谢物生成的方向进行，从而强化次级代谢物的生物合成，提高某些次级代谢物的产率。解析： 暂无解析 -
第13题：
培养细胞的生存环境与条件不包括：（）
- A、竞争菌群
- B、细胞的营养需要
- C、温度条件
- D、液相环境
正确答案:A -
第14题：
动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于：（）
- A、培养基不同；
- B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；
- C、动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；
- D、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。
正确答案:A -
第15题：
简述动植物细胞培养的工艺条件及其控制措施？
正确答案:植物：（1）工艺流程：外植体----细胞的获取---细胞培养----分离纯化----产物（2）控制措施：a温度（一般为室温25℃）；B.pH（PH=5.0-6.0）；c通气与搅拌；d光照的控制；e前体的添加；F.诱导子的应用’
动物：（1）工艺流程：种质细胞-----（胰蛋白酶处理）-----悬浮细胞----（接入）-----培养液-----（人工控制条件）------悬浮培养----（收集）--------培养液------分离纯化------产物（2）控制措施：a温度：一般控制在36.5℃.B.pH值：一般控制在7.0-7.6的微碱性范围内。C.渗透压：应与细胞内渗透压相同。d溶解氧：根据情况随时调节。 -
第16题：
简述植物细胞培养与微生物细胞培养的不同之处。
正确答案:植物细胞培养与微生物的区别：
1.细胞的大小：植物细胞一般比微生物细胞大；
2.细胞块的形状：植物细胞为块状，而微生物细胞有球状、杆状、螺旋状等；
3.培养液的黏度：植物细胞培养液有一定的黏度；
4.需氧量：植物细胞培养的耗氧量比微生物细胞的好氧量少；
5.植物细胞的Kla值比微生物培养的Kla值小得多；
6.植物细胞对剪切力敏感；
7.植物细胞培养需CO2和光照。 -
第17题：
简述植物细胞培养工艺条件的控制。
正确答案:A.温度的控制：室温范围（25℃）。
B.PH的控制：微酸性范围（5－6，5.5－5.8最好）。
C.溶解氧的控制：适当的通风和搅拌。
D.光照的控制：根据植物细胞的特性及目的代谢物的种类进行调节。
E.前体的添加：添加处于目的代谢物代谢途径上游的物质可以提高次级代谢物的产量。
F.刺激素的应用：可以促使物质代谢朝某些次级代谢物生成的方向进行，从而强化次级代谢物的生物合成，提高某些次级代谢物的产率。 -
第18题：
问答题简述植物悬浮细胞培养的必备条件注意事项及其方法。正确答案： 悬浮细胞培养体系必备条件：
①悬浮培养物分散性好、细胞团小；
②细胞形状和大小大致相同；
③生长迅速。悬浮细胞倍增时间为2~3d甚至更短。可直接用悬浮细胞进行原生质体分离、杂交、次生代谢物生产等。
建立悬浮细胞系注意事项：
①合适外植体；
②疏松易碎愈伤组织；
③合适培养基；
④培养液除菌；
⑤暗或弱光悬浮培养；
⑥悬浮细胞继代与选择，保留小细胞团，直到得到均一的悬浮系为止。
植物细胞悬浮培养方法：
（1）分批培养
（2）半连续培养
（3）连续培养解析： 暂无解析 -
第19题：
单选题培养细胞的生存环境与条件不包括：（）A竞争菌群
B细胞的营养需要
C温度条件
D液相环境
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第20题：
填空题能被机体、组织、细胞所感受的生存环境条件的改变，称之为（）。正确答案： 刺激解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述细胞培养基本条件。正确答案： （1）合适的细胞培养基
合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境.
（2）优质血清
目前，大多数合成培养基都需要添加血清.血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分.
（3）无菌无毒细胞培养环境
无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件.在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物质污染，或者自身代谢物质积累，可导致细胞中毒死亡.因此，在体外培养细胞时，必须保持细胞生存环境无菌无毒，及时清除细胞代谢产物.
（4）恒定的细胞生长温度
维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定适宜的温度.
（5）合适的气体环境
气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳.细胞培养基种类与基本成分细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类.干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便.每种细胞都有其合适的培养基。解析： 暂无解析 -
第22题：
单选题在离体培养条件下，维持细胞生长与增殖的技术是（）A细胞融合
B细胞转染
C细胞培养
D细胞杂交
E原代培养
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述与液体培养细胞相比，固定化细胞有哪些优点？正确答案： ① 高度保持反应槽内的细胞量，提高反应效率。
② 固定化使反应活性稳定，能够长期连续地运行。
③ 产物易于和作为催化剂的细胞分离。
④ 柱式或槽式有可能连续运转，易于控制生产中最适宜的生长环境条件、基质浓度等，能使生产稳定。
⑤ 某些重要物质的生产大多利用处于稳定增殖期的细胞，由于固定化可抑制其生长发育，因此应考虑尽可能模拟稳定期等。解析： 暂无解析