菌种保藏的方法、恢复病原微生物毒力的常用方法各是什么?

干燥;低温;缺乏营养;缺氧

E

无论采用何种保藏的方法,首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏,最好保藏它们的休眠体,如分生孢子、芽孢等。其次,应根据微生物生理、生化特点,人为地创造环境条件,使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。这些人工造成的环境主要是干燥、低温和缺氧,另外,避光、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂也能有效提高保藏效果。 菌种保藏的方法有哪些? 一、斜面低温保藏法 二、石蜡油封藏法 三、沙土管保藏法 四、麸皮保藏法 五、甘油悬液保藏法 六、冷冻真空干燥保藏法 七、液氮超低温保藏法 八、宿主保藏法

基本原则:挑选典型菌种的优良纯种;尽量使用分生孢子、芽孢等休眠体;创造有利于休眠的保藏环境(如干燥、低温);尽可能多的采用不同的手段保藏一些比较重要的微生物菌株。措施:降低培养基的营养成分、低温、干燥、缺氧和添加保护剂等。具体方法:传代培养保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、载体保藏法、寄主保藏法、冷冻保藏法、冷冻干燥保藏法。

（1）原理：根据微生物的生理生化特点，选用优良菌株，最好是它们的休眠体，人工地创造适合于休眠的环境条件，即干燥、低温、缺乏氧气和养料等，使微生物的代谢活动处于最低的状态但又不至于死亡，从而达到
保藏的目的。
（2）常用方法：
①斜面冰箱保藏法：将菌种接在适当的斜面上，待其生长丰满后，可放在4℃冰箱中保藏。此法一般可保藏3个月左右。各类菌种均可用此法进行保藏。
②半固体穿刺保藏法：将菌种高洁茹半固体直立柱中，然后进行培养。待长好后，放入4℃冰箱中保藏。此法可保藏半年左右，它适用于细菌、酵母的菌种保藏。
③液体石蜡保藏法：如果将无菌石蜡油加入到上述保藏的菌种中，使菌种与空气隔绝，则保藏效果更佳，一般可保藏三年左右。
④沙土管保藏法：取过筛（60目）河砂，用10%盐酸浸泡、用水洗净后烘干。再取瘦土，以4:1量混合，装入校史馆、灭菌后，滴入几滴菌种悬液，用接种针搅匀。然后放入干燥器中，抽气干燥，放入低温处保藏。此法一般可保藏一至数年。适用于产生孢子的微生物的保藏。
⑤冷冻干燥保藏法：将用灭菌牛奶做成的高浓度的菌液装入灭菌的安瓿瓶中，放在低温条件下抽气干燥，使其中的水分因升华作用逸出，而形成完全干燥的菌块，然后将安瓿瓶在真空条件下融封。这种方法因菌体内的水分全部被抽点，无法进行任何凋谢作用，所以保藏期很长，一般可在5年以上。适用于各大类微生物的保藏。